小麦中呕吐毒素（DON）荧光定量8min快速检测系统，国粮局权威验证

一、呕吐毒素危害及检测方法介绍

    呕吐毒素，学名脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，是单端孢菌素烯烃中的一种，其通常是由生长在谷类物品(如小麦、玉米、大麦和秣草)霉菌镰红菌素生成的。近年来发现，呕吐毒素DON可能与人类的食管癌、IgA肾病有关。人畜摄入了被DON污染的食物／饲料后，会出现厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应变得迟钝等急性中毒的症状，严重时可损害造血系统造成死亡。研究表明，DON可能对免疫系统有严重的影响，有明显的胚胎毒性和一定的致畸作用，可能有遗传毒性，但无致癌、致突变作用。由于DON的严重影响，引起了各国的普遍重视。

    呕吐毒素作为一种常见的真菌毒素，在自然界中广泛存在于小麦等粮谷类农作物中，在世界范围内存在着较高的污染率，小麦一旦被呕吐毒素产毒菌株污染，在适宜生长环境（水分活度 Aw>0. 87）中，产毒菌株会迅速生长，产生呕吐毒素，而小麦中的呕吐毒素又会随小麦粉的生产过程带入到面粉中，严重威胁人体健康。我国 2013 年国家风险监测计划已将小麦和面粉中呕吐毒素含量的监测列为重点。

目前呕吐毒素的检测方法主要分为两大类：即确认方法和快速方法。确认方法主要基于理化仪器设备，如薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高压液相色谱法(HPLC)和各种联用技术如气质联用(GC-MS)、液质联用(HPLC-MS)等；快速方法主要是基于免疫化学基础上的免疫分析方法如免疫亲合柱-荧光检测(IAC-FLD)、酶联免疫吸附法(ELlSA)和胶体金免疫层析法等。

结果准确、法定认可是理化方法最大的优点，但是仪器设备价格昂贵，前处理过程复杂、操作繁琐、效率低，成本极高，因此不适用于大规模样本的筛查和日常的内控检测，一般仅用于最终的确证。酶联免疫吸附法ELISA 方法和胶体金快速检测卡是企业常用的快速检测方法，但也均存在各自的优缺点：ELISA 方法能灵敏度相对较高，且能定量检测，但操作过程相对复杂，对环境和人员要求高，环境干扰因素复杂，重复性较差；胶体金检测卡可以满足现场快速的要求，能在5-10min内快速测定，但是只能定性，且灵敏度较低，肉眼观察主观性较强，重复性差。

二、小麦和面粉中呕吐毒素国家残留限量标准

引自：《GB 2761-2011 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》。

三、南京微测小麦中呕吐毒素荧光定量快速检测系统

    南京微测生物基于荧光定量FPOCT技术平台，开发了呕吐毒素荧光定量快速检测系统，该系统结合了胶体金快速、酶联免疫定量以及色谱法准确的特点，可在8min内快速准确定量的测定出大麦、小麦中的呕吐毒素的含量，样品前处理简单（仅需7min），操作简便，只需一步加样，无需标准品，无需做标准曲线，采用荧光免疫定量分析仪读数，结果准确可靠且可现场打印，准确性高度符合HPLC法的检测结果，为呕吐毒素的快速检测和控制提供了一种全新的技术手段，适用于各类小麦收储、加工企业、检测机构及政府相关监管部门。

3.1.呕吐毒素荧光定量检测试纸条性能

检测灵敏度：25μg/kg；

定量线性范围：100μg/kg - 5000μg/kg；

样品前处理时间：7min；

检测时间：8min；

准确度：回收率为80%-125%；

特异性：在10000μg/kg浓度水平下与其它真菌毒素无交叉反应；

3.2.样品前处理过程

1、粉碎；

2、振荡提取（5min）；

3、离心（2min）；

3.3.检测操作过程

1、稀释；

2、加样反应（8min）；

3、读数，打印检测报告；

检测操作视频地址：http://v.youku.com/v_show/id_XMjg0NjY5MzUwOA==.html

3.4.结果判读和输出

    采用便携式呕吐毒素荧光定量检测仪进行读数，检测结果更加准确、客观，避免人为的误判。

    检测结果将呈现于荧光读数仪液晶显示屏上，同时可按打印键打印获得纸质的检测报告，另外，开通仪器的WIFI数据上传功能后，检测相关数据信息将自动上传至“食品安全溯源管理云平台”，便于溯源及质量管理。

           

3.5.南京微测荧光定量FPOCT技术平台与其他方法学技术性能的对比

3.6.南京微测呕吐毒素荧光定量快速检测方法优点

8min快速准确定量检测：集胶体金快速检测、酶联免疫定量检测、色谱质谱准确检测的特点于一身，可在8min内实现呕吐毒素的快速准确定量测定；

内置定量标准曲线：仪器内置标准曲线，无需使用标准品，无需检测时再做标准曲线，既节省了成本，也避免了操作人员与呕吐毒素的接触，保护操作人员的安全；

行标支持，国粮局权威验证：基于行业标准LST6113-2015，并通过国粮局及农科院的权威验证；

样品前处理简单：前处理方法简单快速，无需对提取液进行pH的调节，大大提升检测的便捷性和检测效率；

随到随检：无需做标准曲线，对检测样本量无要求，既可单个或少量样本随到随检，也可大量样本同时检测，检测成本无区别；既可用于实验室常规质控检测，也可用于收粮现场检测，确保原料收购的质量；

操作简便：对配套的仪器设备和检测人员要求低，操作人员仅需短期培训就能熟练掌握；

样本适用范围广：采用时间分辨荧光专利技术，抗基质干扰强，样本适用性广，既可检测小麦、玉米、大米等原粮，也可检测各种粕类、麸皮、DDGS等饲料原料，还可检测花生油、玉米油等各种植物油；

远程网络支持：仪器可通过网络自动进行标准曲线读取、软件升级、问题故障诊断、质量控制等；

数据上传及溯源管理：荧光定量分析仪具备数据无线上传的功能，可根据客户的需求定制开发相应的数据管理和溯源管理系统，实现公司总部对各分公司、上级监管部门对下级监管部门或者监管部门对各监管对象检测数据的实时掌握和分析；

性价比高：花进口设备三分之一的价格，获得色谱检测的质量和结果，并且节省人力物力，大幅降低检测费用；

FD-100型呕吐毒素荧光定量检测仪基本参数及性能

1、仪器尺寸：210mm×197mm×84mm ，触屏尺寸：3.5英寸，重量：约1kg，轻巧便携，体积精巧，既适合实验室操作，也适合现场操作；

2、激发光源采用LED，激发光谱波长λ0=365nm，接收光谱波长λ1=610nm；并且具有时间分辨荧光功能，读数时间为200us-600us，提高检测的准确度和特异性；

3、测量重复性：台内精密度CV≤1.0%；台间精密度CV≤1.5%；仪器信噪比：0.01%

4、内置标准曲线，通过ID卡导入标准曲线，不需要现场定标；

5、通过仪器内置光电扫描仪扫描条形码切换不同检测项目和批号，检测项目包括黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、T-2毒素等；

6、仪器检测响应时间小于8秒，定量检测结果显示与液晶屏上，显示的结果包括项目名称、浓度、阴阳性判断，参考范围等；

7、可通过内置热敏打印机，也可通过RS232、USB接口传输到电脑，还可通过WIFI无线模块实现数据的远程传输，实现检测数据和信息的溯源管理及大数据分析；

8、可存储记录检测时间，样品编号，产品批次、检测值、阴阳性判断等多种信息，数据储存≥10000条；

9、可根据日期、检测项目进行检索；